Вестник МГТУ, 2022, Т. 25, № 2.

Вестник МГТУ. 2022. Т. 25, № 2. С. 91-100. DOI: https://doi.org/10.21443/1560-9278-2022-25-2-91-100 В общей выборке потомства присутствуют следующие фенотипы (и соответственно генотипы) особей: 1) цельнокрылые (б/в) vg+/vg+; 2) с односторонним повреждением крыла (св 1) vg /vg; 3) с двусторонним повреждением крыла (св 2) vg/vg; 4) рудиментарнокрылые (vg) vg/vg. Постоянное присутствие данных фенотипов в потомстве гетерозиготных особей свидетельствует о классическом расщеплении. Оценка уровня регулируемой клеточной гибели (РКГ) в крыловом имагинальном диске (КИД) личинок проводится следующим образом: I. Для анализа КИД извлекаются крыловые имагинальные диски из отобранных личинок D. melanogaster начала третьего возраста. В течение нескольких минут готовится прижизненный препарат органа в акридиновом оранжевом красителе в концентрации 0,005 % на физиологическом растворе Рингера для насекомых. Для каждой экспериментальной группы используется выборка из 25 КИД. II. Препараты рассматриваются под флюоресцентным микроскопом Leica DM500 B на увеличении в 300 раз при ультрафиолетовом облучении препарата. Для анализа изображения фиксируются с помощью встроенной камеры. Определение РКГ проводится по таким признакам, как конденсация хроматина, уплотнение, изменение цитоплазмы. III. КИД подразделяется на 4 сегмента (компартмента) (Булгакова, 2003), которые обозначаются следующим образом (рис. 1): 1) задне-брюшной (PV или первый); 2) передне-брюшной (AV или второй); 3) задне-спинной (PD или третий); 4) передне-спинной (AD или четвертый). Каждый компартмент оценивается полуколичественным методом со следующими рангами: 0 - отсутствие апоптоза; 1 - апоптоз от единичных проявлений до четверти площади компартмента органа; 2 - площадь фиксируемого апоптоза составляет от четверти до половины площади компартмента имагинального диска; 3 - от половины до трех четвертей площади компартмента диска заполнено апоптирующими клетками; 4 - наблюдается от трех четвертей до полного апоптотического повреждения компартмента диска. D Рис. 1. Крыловой имагинальный диск и его компартменты (Булгакова, 2003): Р - задний; А - передний; V - вентральный; D - дорсальный Fig. 1. The wing imaginal disc and its compartments: P - posterior; A - anterior; V - ventral; D - dorsal (Bulgakova, 2003) В процессе исследований использовались метод изучения фертильности и частоты гибели потомства на эмбриональной стадии развития и морфометрический анализ крыла. 93