Вестник МГТУ, 2021, Т. 24, № 3.
Вестник МГТУ. 2021. Т. 24, № 3. С. 259-266. DOI: https://doi.org/10.21443/1560-9278-2021-24-3-259-266 мультирезистентных биопленок штаммов Kl. pneumoniae и метициллинрезистентного S. aureus с использованием различных концентраций (25, 50, 100, 200, 400, 800 мкг/мл). Образцы ферментных биоконъюгатов показали значительную антибактериальную активность вплоть до самой низкой используемой концентрации и продемонстрировали значительное ингибирование образования биопленки и диспергирование предварительно сформированных биопленок дозозависимым образом. БАД, полученная ферментативным гидролизом мышечного белка O. woodmasoni с использованием термолизина и пепсина с последующей ультрафильтрацией на мембранной установке, очисткой с помощью гель-фильтрационной хроматографии (GFC) и быстрой белковой жидкостной хроматографии (FPLC), состоит из 5 аминокислотных последовательностей (Asn-Gly-Val-Ala-Ala) с молекулярной массой 431 Да через LC-MS/MS TH1-A1. Исследованиями доказано, что БАД - пептид - токсичен для клеток MCF-7, имеет высокую антиоксидантную активность при рН от 2 до 10. Пептид может быть лучшей альтернативой нутрицевтической и функциональной пище после дополнительных исследований (Abeleda et al., 2020). БАД на основе катионного изопептида е-поли-Ь-лизин (e-PL) проявляет антимикробную активность против широкого спектра бактерий, дрожжей и грибов, нацеливаясь на клеточную мембрану, и является термостабильным и активным в различных пищевых матрицах (Joshi et al., 2020; Xu et al., 2016). Нами разработана технология производства ферментативного гидролизата из фабрициевой сумки (ФС) цыплят-бройлеров. ФС - это орган иммунной системы птицы, где формируются и созревают В-лимфоциты, функцией которых является выработка антител, также они продуцируют интерлейкин, который активирует НК-клетки. Соответственно, можно предположить, что полученная БАД обладает иммуномодулирующим действием. Целью работы является оценка влияния ферментативного гидролизата фабрициевой сумки цыплят- бройлеров на цитотоксичность и неспецифический иммунитет мышей на фоне экспериментальной сальмонеллезной инфекции. Материалы и методы Для оценки возможного цитотоксического влияния ферментативного гидролизата фабрициевой сумки цыплят-бройлеров на метаболизм клеток млекопитающих использовали перевиваемые культуры клеток человека и мыши (табл. 1), полученные из коллекции клеточных культур Института цитологии Российской академии наук. Перед использованием в экспериментах культуры клеток были тестированы на жизнеспособность и функциональную активность согласно соответствующим стандартам. При изучении общей токсичности использовали биотехнологические методы в виде различных биотестов оценки общей жизнеспособности клеточного монослоя. Нарушение любой из жизненно важных клеточных функций неминуемо влечет за собой через определенное время снижение жизнеспособности и гибель клетки, поэтому все эти биотесты в своей основе используют регистрацию либо количества погибших, либо количество живых клеток в испытуемой культуре. Таблица 1. Перечень использованных в исследованиях клеточных линий и первичных культур клеток экспериментальных животных Table 1. List of cell lines and primary cell cultures used in experimental animal studies Название клеточной линии Дифференцировочные признаки Мышиные фибробласты L929 Фибробласты мыши, адгезивная культура с образованием монослоя Макрофагоподобная мышиная клеточная линия J774.1A Макрофаги мыши, адгезивная культура с образованием монослоя Человеческая линия эпителиальных клеток матки HeLaS3 Клетки эпителия человека, адгезивная культура с образованием монослоя Человеческая линия эпителиальных клеток карциномы кишечника HCT116 Клетки эпителия человека, суспензионная культура Человеческая эритромиелоблатоидная линия К562 Эритромиелобластные клетки крови человека, суспензионная культура Опухолевые клетки линии MCF-7 Клеточная культура аденокарциномы молочной железы Изменения метаболического состояния клеток оценивали биотехнологическим методом, сущность которого заключается в оценке снижения суммарной активности митохондриальных дегидрогеназ в микротетразолиевом тесте (МТТ), который является одним из наиболее общепринятых биотехнологических методов оценки цитотоксичности и основан на способности дегидрогеназ митохондрий восстанавливать 261
Made with FlippingBook
RkJQdWJsaXNoZXIy MTUzNzYz