Труды КНЦ вып.8(Океанология) вып. 5/2020(11)
Целью данного исследования было определить качественный и количественный состав САК у четырех видов сублиторальных красных водорослей Мурманского побережья Баренцева моря. Материал и методы. Исследование содержания САК проводили у сублиторальных красных водорослей, собранных на глубине 9 м в губе Зеленецкая Баренцева моря в июле 2019 г. Сбор материала осуществляли с помощью водолазов. В качестве объекта исследования были использованы красные водоросли Palmaria palmata (Linnaeus) F. Weber & D. Mohr, 1805 (Florideophyceae: Palmariales), Phycodrys rubens (Linnaeus) Batters, 1902 (Florideophyceae: Ceramiales), Wildemania miniata (C. Agardh) Foslie, 1891 (Bangiophyceae: Bangiales) и Polysiphonia arctica J. Agardh, 1863 (Florideophyceae: Ceramiales). Для определения содержания САК собранные водоросли фиксировали 96 %-м этанолом и хранили до обработки в темном, прохладном месте. Содержание сухого вещества измеряли согласно общепринятой методике (ГОСТ 26185-84 ., 2004). Извлечение САК проводили горячим 70 %-м этанолом. Для этого фиксированные водоросли измельчали в ступке со стеклом, заливали горячим 70 %-м этанолом и экстрагировали при постоянном перемешивании в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем отделяли водоросли от экстракта центрифугированием при 3000 об/мин в течение 5 мин. Экстракт сливали в выпарительную чашку, а осадок водорослей вновь заливали горячим 70 %-м этанолом. Извлечение аминокислот повторяли 3 раза. Все полученные экстракты сливали и выпаривали в чашках досуха на водяной бане. Сухой осадок растворяли в небольшом объеме дистиллированной воды. Определение содержания САК проводили согласно (Методика ., 2014) с предварительной дериватизацией аминокислот. Для этого аликвоты полученных экстрактов выпаривали в токе теплого воздуха. Сухие осадки растворяли в 150 мкл 0.1 моль/л раствора карбоната натрия, а затем добавляли 300 мкл раствора фенилизотиоцианата в изопропаноле. Все тщательно перемешивали до растворения осадка и оставляли на 35 мин при комнатной температуре для преобразования. Затем растворы выпаривали досуха в струе теплого воздуха. Сухие осадки растворяли в дистиллированной воде. Подготовленные для анализа пробы центрифугировали в течение 5 мин при 5000 об/мин. Определение содержания САК проводили на системе капиллярного электрофореза “ Капель-105М ” фирмы “ Люмэкс ” с использованием кварцевого капилляра общей длиной 75 см и внутренним диаметром 50 мкм и фотометрическим детектором. Электрофорез проводили при температуре 30 о С, напряжении +25 кВ и давлении 0-50 мбар в зависимости от определяемых соединений. Детектирование проводили на длине волны 254 нм. 94
Made with FlippingBook
RkJQdWJsaXNoZXIy MTUzNzYz