Труды КНЦ вып.8 (ГЕЛИОФИЗИКА вып. 7/2017(8))
высокоширотные факторы среды могут оказывать влияние на процесс деления клеток, в результате чего может меняться частота цитогенетических нарушений в клетках лимфоцитов относительно аналогичных клеток у проживающих в средних широтах людей. Материалы и методы исследований Микроядерный тест проводили на ФГА-стимулированных лимфоцитах цельной периферической крови человека в соответствии со стандартной методикой [5-7]. Долю двуядерных клеток с микроядрами оценивали относительно 1000 двуядерных клеток, цитокинез которых был остановлен цитохалазином В (ЦХВ), т. е. в клетках, проходивших первый митоз между 48 и 72 ч после стимуляции ФГА [8]. Оценка частоты встречаемости клеток с генетическими и цитологическими нарушениями [9] проводили на основе анализа не менее 1000 клеток на каждом препарате. На препаратах идентифицировали: одноядерные клетки, все многоядерные клетки без нарушений (2-, 3- и 4-ядерные клетки), все полиядерные клетки с микроядром или несколькими микроядрами, а также ядра с насечкой, вакуолизацию ядра, нарушения типа ядерных почек и протрузий. Микроядра идентифицировали как хроматиновые округлые тела с гладким непрерывным краем, размером не более 1/3 ядра, лежащие отдельно от основного ядра, не преломляющие свет, с интенсивностью окрашивания и рисунком хроматина, как у основного ядра, и находящиеся в одной плоскости с ядром [9]. Анализ препаратов проводили с помощью микроскопа AXIOSTAR PLUS (Karl Zeiss, Германия) (об. 15х ок. 40, 100), оснащенного камерой CoolSNAPes (Photometries) с цифровой системой регистрации и обработки изображения на базе ПЗС (Media Cebemetics, Inc.). Все полученные данные вносились в реляционную многопользовательскую базу данных [10]. Статистическая обработка материала проводилась в соответствии с рекомендациями, подготовленными на основе руководящих принципов для проведения исследований с использованием микроядерного теста, разработанных на втором заседании «Международной рабочей группы по оценке генотоксичности» (Вашингтон, США, 25-26.03.1999). Согласно данным рекомендациям, выбор статистических методов анализа должен определяться характером распределения. Особо отмечается, что статистическая значимость не должна быть единственным фактором для определения положительных результатов, руководствоваться необходимо биологическим смыслом обнаруженного явления [3]. Материалом для исследования служили образцы периферической крови 33 детей в возрасте от 14 до 18 лет, проживающих на территории Мурманской обл., забор которой был произведен в 2014-2017 гг. Группа детей была представлена 23 подростками Ловозерского (с. Ловозеро, п = 13; с. Краснощелье, п = 10) и 13 школьниками из Апатито-Кировского района. Полученная выборка детей, проживающих в селах Ловозеро и Краснощелье, охватывает практически все детское население данной возрастной группы [11]. Группа сравнения была представлена школьниками старших классов (20 человек, возраст 14-18 лет), проживающими в Серпуховском районе Московской обл., забор венозной крови был произведен в 2016 г. 62
Made with FlippingBook
RkJQdWJsaXNoZXIy MTUzNzYz