Харламова, М. Н. Флуоресценция РОВ и водные растения : монография / М. Н. Харламова ; М-во образования и науки Рос. Федерации, Мурм. аркт. гос. ун-т. - Мурманск : Мурманский арктический государственный университет, 2016. - 123 с. : граф., табл.
При содержании лабораторных культур рачков были созданы и под держивались следующие оптимальные условия: температурный режим 20±2°С; световой день 10 часов при естественном освещении с досвечива- нием лампами дневного света; содержание кислорода в используемой воде 6-7 мг/л, pH - 7,0-8,2. Для культивирования D. magna и постановки опы тов использовалась водопроводная вода после удаления из нее остаточного хлора и биологизации. Это достигалось путем длительного продувания воздуха в аквариуме с помощью микрокомпрессора (14 дней). На дно ак вариума засыпался хорошо промытый речной песок, помещались веточки элодеи. В качестве корма для дафний использовали зеленые протококко вые водоросли Chlorella sp. (Исакова, Колосова, 1988). Водоросли еже дневно вносили из такого расчета, чтобы они практически полностью вы едались дафниями до следующего кормления. Присутствие клеток водо рослей в экспериментах с ракообразными периодически контролировали под микроскопом. Эксперименты проводили в стаканах емкостью 250 мл с объемом во ды 200 мл. Для посадки использовали молодь дафний одного возраста (3-х дневных). Количество дафний в разных опытах составляло 7-9 штук. Опыты ставили в трех повторностях. В ходе экспериментов замену среды не производили. По мере испарения воды из экспериментальных емкостей перед забором проб на флуоресцентный анализ во избежание концентри рования среды в стаканы добавляли дистиллированную воду до исходного уровня. В качестве основных биологических показателей отмечали выжи ваемость дафний и количество появляющейся молоди с дальнейшим пере расчетом на одну самку. Молодь после подсчета удаляли. Исследование полос флуоресценции водных сред в присутствии ракообразных проводили как при нормальном развитии культуры, так и в условиях токсикологиче ского стресса. В качестве токсикантов использовали калий двухромово кислый и медь сернокислую в концентрациях 0,01 мг/л, рассчитанных на ион хрома и меди соответственно. Концентрацию токсикантов подбирали из расчета оказания ею хронического сублетального действия: не приво дящего к гибели дафний, но вызывающего физиологические нарушения. Полосы флуоресценции измеряли на «Флуорате» при следующих сочета ниях светофильтров возбуждения/регистрации: 266/314, 376/452, 376/500 и 376/534. Продолжительность экспериментов составляла при интоксикации хромом 21 сутки и медью - 12 суток. В эксперименте с медью дафний от саживали спустя 5 суток экспозиции с тем, чтобы оценить возможный вклад микрофлоры в остаточную динамику флуоресцирующей части РОВ. Для уточнения отдельных фактов, полученных в предыдущих экспе риментах, был поставлен отдельный опыт для анализа состояния, так на зываемой «воды скоплений» (Эффект группы.., 1976). Количество дафний в стакане увеличивали до 13 штук. Опыты ставили в двух сериях и трех повторностях. Рачков кормили до 5 суток экспозиции включительно. Затем 55
Made with FlippingBook
RkJQdWJsaXNoZXIy MTUzNzYz