Харламова, М. Н. Флуоресценция РОВ и водные растения : монография / М. Н. Харламова ; М-во образования и науки Рос. Федерации, Мурм. аркт. гос. ун-т. - Мурманск : Мурманский арктический государственный университет, 2016. - 123 с. : граф., табл.
используется ксеноновая газоразрядная лампа мощностью 150 Вт с непре рывным спектром излучения в исследуемой нами области (и отдельной спектральной линией 468,5 нм). Погрешность измерения длины волны со гласно техническому описанию составляла ±1,5 нм, а воспроизводимость ре зультата ±0,5 нм. При регистрации спектров применяли стандартную (в ком плекте с прибором) кювету с плоскопараллельными стенками длиной 10 мм и объемом исследуемой жидкости 3 мл. Длина волны возбуждения флуорес ценции составляла 266 нм. Данная длина волны возбуждения при измере ниях флуоресценции РОВ ранее не использовалась, хотя в научной литера туре содержались косвенные обоснования возможной эффективности при менения длин волн порядка 200-300 нм для количественного анализа РОВ (Иванов, 1975;Ерлов, 1980; Yentsch, Reichert, 1962). Такая длина волны была выбрана также и для того, чтобы в максимальной степени избежать пере крытия области флуоресценции РОВ с полосами излучения Рамана и Рэлея. Спектры флуоресценции регистрировали на длинах волн 300-520 нм. При этом пик комбинационного рассеяния воды (рассеяние Рамана) при ходился на 292 нм, а излучение рэлеевского типа, именуемое «двойным порядком рассеяния дифракционной решетки», соответственно - на 532 нм (см. рис. 8 на стр. 82, 0-е сутки). Скорость развертки длины волны при регистрации спектров флуо ресценции устанавливали равной 50 нм в мин, что при интервале считыва ния (интегрирования) в 5 сек соответствовало шагу сканирования 4 нм. Данные выдавались на цифровое печатающее устройство DP-101 фирмы «Jasco», комплектующееся со спектрофлуориметром. Затем данные, напе чатанные на бумажной ленте, заносили в персональный компьютер. Обработку и визуализацию спектров проводили с использованием стан дартного приложения Microsoft Excel for Windows., а статистический ана лиз данных - с применением прикладного пакета Statistica. Кроме спектров флуоресценции регистрировали так называемые спектры возбуждения. Спектры возбуждения - это функция распределения излучаемой веществом энергии в зависимости от длины волны (или часто ты) возбуждения. В принципе форма спектра возбуждения должна быть идентична форме спектра поглощения молекул и не зависеть от длины волны, на которой измеряют флуоресценцию. Однако это выполняется очень редко. Дело в том, что спектры поглощения и возбуждения могут отличаться из-за различия химических и физических свойств молекул в возбужденном состоянии по сравнению с основным (Левшин, Салецкий, 1994). При анализе сложных растворов, какими являются природные воды, главное отличие спектров будет состоять в том, что не все вещества, кото рые поглощают свет, будут флуоресцировать. То есть спектр возбуждения будет более избирательным по сравнению со спектром поглощения. Спектр возбуждения определяли следующим образом: регистри рующий монохроматор спектрофлуориметра устанавливали на длину вол 49
Made with FlippingBook
RkJQdWJsaXNoZXIy MTUzNzYz