Артёмкина Н.А. Экстрактивные вещества хвои и побегов Picea abies (L.) Karst. 1. Фенольные соединения, их выделение и идентификация. Растительные ресурсы. 2004, Т. 40, вып. 3, с. 77-87.

дорастворимых веществ хроматографировали на колонках с силикагелем, элюирующие смеси: петролейный эфир—этилацетат (содержание этилаце- тата от 70 до 100 %) (I), этилацетат—этанол (90 : 10) (II), этилацетат—эта­ нол—вода (10 : 2 : 1) (III). Сумму веществ, элюированных из колонки этано­ лом, повторно хроматографировали на полиамиде смесью хлороформ—эта­ нол (IV), в которой содержание этанола составило от 0 до 30%. Полученные фракции разделяли на индивидуальные соединения методом колоночной хроматографии или препаративной ТСХ на силикагеле с помощью различ­ ных систем растворителей: бутилацетат—петролейный эфир (85 : 15) (V), аце­ тонитрил—вода (85 : 15) (VI), этилацетат—петролейный эфир (90 : 10) (VII), этилацетат—этанол (95 : 5) (VIII), толуол—этанол—хлороформ ( 4 : 2 : 1 ) (IX), толуол—ацетон (90 : 10) (X). Контроль за ходом разделения веществ осуществляли методом аналити­ ческой ТСХ. Обнаружение фенольных соединений проводили путем про­ смотра пластинок в УФ-свете. Хроматограммы проявляли в кювете с J2, опрыскивали 50 %-ным водным раствором H 2 S 0 4, 10 %-ным спиртовым раствором H 2 S 0 4 с добавлением анисового альдегида (С 8 Н 8 0 2) или диазоти- рованной сульфаниловой кислотой (реактив Паули). А ц е т и л и р о в а н и е . 10—100 мг смеси или чистого соединения раство­ ряли в 1 мл пиридина и добавляли 2 мл уксусного ангидрида, оставляли на 24 ч при комнатной температуре. При добавлении в ацетилирующую смесь ледяной воды выпадал осадок, который промывали водой. Ацетаты индивидуальных соединений перекристаллизовывали из спирта. Смесь аце­ татов далее делили с помощью препаративной ТСХ. К и с л о т н ы й г и д р о л и з . 5 мг соединения нагревали с 2—3 мл смеси 2 М раствора трифторуксусной кислоты—метанола (ТФК—МеОН) в соот­ ношении 1 : 1 в течение 30—120 мин на кипящей водяной бане (время гид­ ролиза зависело от структуры исследуемого соединения). Контроль за пол­ нотой гидролиза проводили методом ТСХ. После окончания гидролиза ТФК отгоняли на ротационном испарителе ИР-1М под вакуумом при тем­ пературе не выше 60 °С. Сухой остаток обрабатывали сначала диэтиловым эфиром или этилацетатом, экстрагируя таким образом агликон, а затем его растворяли в воде и анализировали на присутствие углеводных компо­ нентов с помощью аналитической ТСХ на силикагеле в системе ацетонит­ рил—вода (85 : 15). В качестве проявителя использовали раствор анилин- фталата в этаноле. После обработки хроматограмм проявителем пласти­ ну нагревали в сушильном шкафу при температуре 100—105 °С в течение 5 мин. Щ е л о ч н о й г и д р о л и з ( д е а ц и л и р о в а н и е ) . Выделенное соедине­ ние растворяли в 5 мл смеси 2 М раствор NaOH : МеОН (1 : 1) и оставляли в закрытой колбе при комнатной температуре на 2 ч (контроль за полнотой гидролиза проводили методом ТСХ). После гидролиза смесь нейтрализова­ ли 2 М раствором НС1 (1 : 1), жидкую фазу досуха отгоняли под вакуумом при температуре 40 °С. Сухой остаток обрабатывали диэтиловым эфиром для извлечения кислотного компонента (уксусной кислоты или фенолоки- слоты в зависимости от исходного соединения). Деацилированный глико- зид растворяли в этаноле и анализировали методом ТСХ. Строение индивидуальных соединений устанавливали с помощью спек­ троскопии — УФ, ЯМР Н 1 и C I 3 (CDCI3, CD 3 OD, C 3 D60 и DMSO, 8 -шкала, прибор Bruker-AM 500 с рабочей частотой 500 МГц и 125.76 МГц соответст­ венно) и масс-спектрометрии (прибор МХ-1321, ионизация электронным ударом (70 и 30 эВ), прямой ввод). 80