Мурманский морской биологический институт. Труды Мурманского морского биологического института. Вып. 5 (9) / Акад. наук СССР. - Москва ; Ленинград : Изд-во Акад. наук СССР,1964.

182 К . М. ХАЙ Л О В ротки крови, являющийся видовым или родовым признаком у ряда живот ных (Dessauer a. Fox, 1956; Moor, 1945) и зависящий в значительной сте пени от функции клеток печени (Капланский и Кузовлева, 1957). Ранее было показано также (Zamenhof, 1957), что ДНК раковых клеток мыши вызывает в клетках печени последней значительные необратимые изме нения. На этом основании предполагалось, что в случае трансформации части клеток печени реципиента под воздействием ДНК донора в крови реципиента могут произоііти те или иные изменения в соотношении бел ковых фракций и эти изменения можно будет зарегистрировать. Одним из условий проведения такой работы, естественно, является суще ствование различий в белковом составе сыворотки крови донора и реципиента. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ В качестве основного животного была взята треска Gadus morhua се мейства тресковых. Основноіі донор пикша Melanogrammus aeglejinus — того же семейства. Для исследования белкового состава нормальной сы воротки бралась молодь трески размером 7—22 см и пикша размером 8— 22 см. Исследованию подверглись 42 экз. трески и 15 экз. пикши. Для опытов в аквариумы отсаживалась молодь трески размером 7— 9 см. Донорами ДНК были: пикша 12—22 см в качестве близкородствен ного организма, морская звезда Asterias rubens в качестве неродственного организма и треска размером 25—38 см для инъекций тому же виду. Пре параты ДНК получались по методу Г. П. Георгиева (1959) у пикши и трески из печени, а у морской звезды из печеночных органов. Характери стическая вязкость ДНК определялась по ИІахман в 0.2 м NaCl при 25° при концентрации 20—120 мкг ДНК на 1 мл, содержание азота — методом микрокьельдаля, содержание фосфора — по Кингу. Препараты ДНК имели следующие показатели: характеристическая вязкость 4100—4200 для трески и пикши и 4500 для морской звезды, соот ношение N / P—1.73 и 1.68 соответственно. Таким образом, полученная для инъекций ДНК находилась в полимерном состоянии и не имела существен ных примесей белка. Препараты ДНК в растворе хлористого натрия в разведении 2 : 1000 вводились реципиентам в три приема в объеме 0.5—1.0 мл за одну инъекцию с периодичностью в 2—3 дня. Инъекции делались внутрибрюшинно. Сум марная доза введенной ДНК составляла примерно 5 мг на одну особь. В контроле треске вводился равный объем физиологического раствора. Электрофоретический анализ сыворотки проводился в 2—3 срока: первый раз через 5 дней, второй — через 15 дней и, наконец (в одной серии), через 25 дней после начала инъекций. Каждый раз для анализа использовалось 5—10 рыб. Кровь бралась из хвостовой вены. Сыворотки, полученной от одной особи, хватало для проведения одного анализа. Электрофорез проводился в аппарате медицинского типа ЭМИБ в борат- ном буфере рН-8.6 при напряжении 300—370 вольт, силе тока 7—8 т А и ширине полос бумаги 2.5 см (шесть полос в каждом случае). Разделение длилось 20—24 часа. Помещение прибора в холодильник позволяло вести разделение при температуре 4—5°. Электрофореграммы разрезались на отрезки, соответствующие основным фракциям, и после элюции в 0.01 н. растворе NaOH производилось количественное определение фракций на электрофотоколориметре ФЭК-М. По свидетельству Ковальчик (Kowalc- zyk, 1959), такой метод оценки электрофореграмм дает наиболее точные результаты.