Мурманский морской биологический институт. Труды Мурманского морского биологического института. Вып. 4 (8) / Акад. наук СССР. - Москва ; Ленинград : Изд-во Акад. наук СССР,1962.

Проявление для целей и качественного, и количественного анализа осуществлялось раствором анилинфталата пи Партриджу (Partridge, 1948). Для качественного анализа сухая хроматограмма опрыскивалась из пульверизатора проявителем, и окраска развивалась в течение 5 минут в сушильном шкафу при 90—100°. Для количественного анализа сухую хроматограмму обильно смачи вали проявителем из того же пульверизатора. Окраска развивалась в те чение 15 минут в сушильном шкафу при 115°. М е т о д и к а к о л и ч е с т в е н н о г о о п р е д е л е н и я с а х а р о в . Определение по Бэру (Вааг, 1954) проводили следующим обра зом. Из хроматограмм с проявленными пятнами сахаров эти пятна выре зались одинаковыми но площади кусочками. Все кусочки нарезались ножницами в отдельности с получением бахромы. Эти кусочки помещались в пробирки и заливались каждый 3 мл ледяной уксусной кислоты, предва рительно освобожденной от альдегидов. Через 12—14 часов стояния при комнатной температуре элюаты фотометрировались в фотоэлектро колориметре ФЭК-М с синим светофильтром (410 ммк) против экстракта пустого кусочка бумаги той же площади. Результат определения выра жался в у глюкозы, для которой была заранее построена калибровочная кривая. Определение но Дюмазеру (Dumazert, 1934) применялось в тех случаях, когда нужно было узнать природу сахара, проявляемого на хромато грамме анилинфталатом, но имеющего Rf меньше галактозного и глю- козного. Проявление анилинфталатом говорило о наличии псевдоальде- гидной группы, на определении которой и основывается этот метод. Этим методом, зная молекулярный вес альдозы, можно по имеющейся формуле определить точное количество сахара в опытном растворе. Для наших целей достаточно было сравнить редуцирующую способность выделен ного сахара и его гидролизата. Для этого выделенный из непроявленной хроматограммы после хроматографирования в виде элюата сахар опреде лялся сразу же в одной половине элюата. Другая половина элюата гидро лизовалась в 196-й соляной кислоте в течение 2.5 часов на кипящей водя ной бане. После нейтрализации содой в растворе определялась редуцирую щая способность. Э л ю ц и я. Элюция сахаров из непроявленной хроматограммы уже описана (Барашков, 1960а). Принцип метода — элюция вырезанных из непроявленной хроматограммы полосок бумаги с разделенным каким- либо сахаром. Процесс проводился в большом эксикаторе, в который помещался специально сделанный простой прибор. На дне эксикатора находилась вода, создающая «водяную атмосферу». Элюция сахаров про ходила за 10—12 часов. О п р е д е л е и и е с у м м ы с а х а р о в с а п т р о н о м про водилось по Дрейвуду (Dreywood, 1946). Раствор готовился перед опре делением в 9 2 /6-й серной кислоте из расчета 2 мг антрона на 1 мл кислоты. Экстинкция измерялась в ФЭК-М с красным светофильтром (680 ммк) против контроля. Расчет количества сахаров велся по кривой, снятой ранее для известных количеств глюкозы. Э л е к т р о ф о р е з н а б у м а г е . Электрофорез проводился при исходной силе тока 7.5 Л и напряжении 300 вольт. На середину бумажной полосы наносилось каждый раз по 400 у органического ве щества фракции 1 пробы 6. Буфером служил вероналовый буфер pH 5.25 и 8.65 с ионной силой 0.5 и 1. Продолжительность опыта в первом буфере была 3 и 19 часов, в буфере pH 8.65 — 10 часов с одинаковым конечным результатом, точнее — без результата. Проявление белковых веществ осуществлялось раствором, в котором было 500 мл дистиллированной воды, 250 мг бромфенолового синего, 37