Мурманский морской биологический институт. Труды Мурманского морского биологического института. Вып. 4 (8) / Акад. наук СССР. - Москва ; Ленинград : Изд-во Акад. наук СССР,1962.

Н а н е с е н и е г и д р о л и з а т а н а б у м а г у . В зависи мости от цели хроматографирования гидролизат наносили по-разному. Для качественных и количественных целей гидролизат, содержащий около 250 у-сахаров, наносили капилляром на отдельные точки, отстоя щие на 2—2.5 см друг от друга на стартовой линии бумаги. Для препа ративных целей гидролизат наносили на стартовую линию полосой вдоль линии. Для активного высушивания наносимого раствора вдоль старто вой линии пропускали струю воздуха. Б у м а г а . Для хроматографирования служила бумага «быстрая» и «медленная» Ленинградской бумажной фабрики им. Володарского, немецкая хроматографическая бумага и основа крабового пергамента. В основном работа проводилась на «быстрой» и «медленной» бумаге. Формат листа в каждом отдельном случае зависел от сосуда, в кото ром проводили опыт. При нисходящем способе хроматографирования стартовая линия располагалась на 4.5 см от конца бумаги, точки нане сения раствора отстояли друг от друга на 2.5 см. Формат листа был ра вен 20x40 см. Характерной для всех опытов являлась простая форма листов: или прямоугольная, или круговая. Р а с т в о р и т е л и . Основным рабочим растворителем служила смесь н. бутанол—этанол—вода в отношениях 4 : 1 : 5 и 40 : 11 : 19 (Блок, Лестранж, Цвейг, 1954). Второй состав был признан более эко номичным, так как при смешивании компонентов в указанном соотноше нии получается однородная жидкость без деления на два слоя, как в пер вом случае. Еще одним растворителем служила смесь бензол—пиридин—н. бута нол—вода в отношении 1 : 3 : 6 : 3 (Gaillard, 1953). Этот состав дает возможность легко отделять на хроматограмме галактозу и глюкозу, которые имеют близкие Rf в бутанол-этанольном растворителе. Более быстрый разгон сахаров можно получить при замене этанола уксусной кислотой, но возможность искажения результата при коли чественной работе заставила перейти целиком на вариант с этанолом. С п о с о б ы п о л у ч е н и я х р о м а т о г р а м м . Мы получили лишь одномерные хроматограммы углеводов исследованных диатомей. Двумерные хроматограммы делались только при анализе аминокислот ного состава. Одномерные хроматограммы получались нисходящим спо собом. Для качественных целей получались требующие меньшего количества времени круговые хроматограммы. Они ставились в эксикаторах обычным способом (Пасхина, 1950). Для контрольных целей употребляли также восходящий способ получения хроматограмм в пробирках. Для идентификации проявляемых сахаров в качественном анализе, помимо обычного нанесения параллельно с опытным раствором извест ных сахаров, применяли метод усиления пятен «свидетелями», что позво ляет без специальной тщательной очистки опытного раствора точно опре делить на небольшой по длине хроматограмме качественный состав иссле дуемой смеси. В целях более четкого отделения углеводов друг от друга для коли чественных анализов применяли метод «множественного проявления». Этот метод позволяет разделить в бутанол-этанольном растворителе даже галактозу и глюкозу, имеющих в нем очень близкие величины Rf. Большая затрата растворителя вполне оправдывается хорошими резуль татами. Контроль за прохождением фронта растворителя велся визуально. Количество сахаров в наносимой смеси, наилучшее для количествен ного анализа, находили эмпирически. Для наших гидролизатов оно равня лось около 250 у. В бутанол-этанольном растворителе количество «про явлений» было 5—7, в бензол-пиридиновой смеси 2—3 раза. 36